NovaBlue(DE3)感受态细胞 ,表达感受态细胞

NovaBlue(DE3)：100μl/支  
pUC19(controlvector，10pg/μl):10μl  
保存条件(保质期)：-80℃（6个月）  
基因型  
F`[proA+B+lacIqZΔM15::Tn10(TetR)]endA1hsdR17(rk12-,mk12+)supE44thi-1recA1gyrA96relA1lac(DE3)  
产品说明  
NovaBlue(DE3)来源于K12菌株，具有极高的转化效率，是转化效率最高的原核表达菌株，可同时用于普通质粒的构建和蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株染色体DNA中整合了λ噬菌体DE3区，使得NovaBlue(DE3)菌株可同时表达T7RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，广泛用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。NovaBlue(DE3)菌株具有四环素抗性，endA1和recA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取；lacZΔM15的存在使NovaBlue(DE3)可用于蓝、白斑筛选。NovaBlue(DE3)感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率达109cfu/μgDNA。  
操作方法  
1.NovaBlue(DE3)感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底混匀，冰中静置25分钟。  
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。  
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。  
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上（若质粒浓度较高，也可稀释后涂板，务必保证能在平板上挑到单克隆菌落）。  
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。