潮霉素B ,超纯，90%

中文名称：潮霉素 B
CAS号：31282-04-9
英文名称：Hygromycin B
纯度：超纯，90%
英文名：Hygromycin B
CAS号：31282-04-9
分子式：C20H37N3O13
分子量：527.52
熔点：160-180℃
储存条件：2-8℃
用途： 科研实验。阻止多肽合成和抑制延长。用于原核和真核细胞的选择和保藏。
应用浓度： 
潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化。推荐使用浓度为50-1000μg/mL，最佳浓度需要杀灭曲线来确定。 
哺乳动物细胞·200-500μg/mL；细菌/植物细胞·100-300μg/mL；真菌·300-1000μg/mL； 
产品使用： 
使用一：杀灭曲线确定最佳杀死浓度（仅作参考，因个人检测体系而异） 
（1）往组织培养级的96孔板内加入未转染细胞，细胞密度约50-200细胞/孔；细胞贴壁之后，往每孔加入含不同浓度（如50-1000μg/mL，至少5个浓度）潮霉素B的200μL新鲜培养基； 
（2）37℃，5%CO2培养箱孵育细胞10-14天； 
（3）培养5-7天后更换新的培养液，培养液内含有相应浓度的潮霉素B； 
（4）10-14天后使用细胞增殖方法如MTT，CCK-8等评估细胞活力；也可以通过检测细胞克隆数或百分比汇合率来确定毒性效应。一般选择在10-14天能够杀死所有细胞的最小浓度为最佳筛选浓度。 
使用二：筛选稳定转染细胞 
（1）对于贴壁细胞，直接吸去60mm培养皿内的转染细胞培养基，然后加入含有潮霉素B的新鲜培养基5-6ml；对于悬浮细胞，无菌条件250xg,离心10min除去旧的转染细胞培养基，然后悬浮在约5ml的含潮霉素B的新鲜培养基； 
（2）5-7天后，如上方法更换含有潮霉素B的新鲜培养基； 
（3）再孵育细胞5-7天； 
（4）10-14天孵育后，培养体系中只含有能够表达潮霉素B抗性表型的活细胞。因此筛选之后如步骤一，更换不含潮霉素B的新鲜培养基。