溴化乙锭溶液(10mg/ml) ,1ml

别名: EB溶液
Cas号: 物化性质:
分子式: 熔点:
分子量: 沸点:
EINECS编号: 密度:
MDL号: 储存条件:

  
化乙锭溶液/EB(10mg/ml)  
溴化乙锭,英文名Ethidiumbromide,缩写EB,一种DNA嵌入剂,可插入DNA/RNA中,其插入双链RNA、双链DNA后荧光强度分别增强21倍、25倍,因此在低浓度(10μg/ml)染色后无需脱色,是分子生物学常用的一种高度灵敏的嵌入性荧光核酸染料、移码诱变剂、DNA/RNA酶抑制剂。溴化乙锭用于紫外下观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA及核酸的许多荧光分析,还可结合到单链DNA(虽然强度不高)和三链DNA上。另外,EB可与吖啶橙结合用于区分存活的、凋亡和坏死的细胞。  
本品为10mg/ml的溴化乙锭储存液,用于电泳检测时,工作浓度为0.5μg/ml。  
使用方法  
一、胶染法(电泳前染色)  
1.制胶时加入EB核酸染料使其工作浓度0.5μg/ml(每50mL琼脂糖溶液中加入2.5μL10mg/mlEB水溶液)。  
2.按照常规方法进行电泳。  
注意事项  
1)此方法比较节省染料,250μL(10mg/ml)染料大约可以做100块50mL的胶。  
2)EB兼容所有常用的电泳缓冲溶液。  
3)胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。  
4)在染料的存在下,线状双链DNA的迁移率减小了15%。  
二、泡染法(电泳后染色)  
1.按照常规方法进行电泳。  
2.室温下将电泳后的凝胶在含有EtBr(0.5ug/ml)的电泳缓冲液或水中浸泡30-45min。  
3.(可选)对于检测较小量DNA(<10ng),可将EB染色后的凝胶于水或1mMMgSO4中室温脱色20min,从而降低因未结合EB引起的背景荧光信号。  
特别注意事项  
1)由于EB具有强诱变性,操作时一定要小心避免直接接触皮肤。实验结束后,应对含EB的溶液进行净化处理再行弃置,以避免污染环境和危害人体健康;  
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。  
运输和保存方法  
2-8℃。有效期2年。
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溴化乙锭溶液(10mg/ml)