英文名称:T3RNAPolymerase
级别:BR
活力:20u/ul
活力定义:Oneunitofenzymeincorporates1nanomoleofAMPintoapolynucleotidefraction(adsorbedonDE-81)in60minutesat37℃
质量控制:Testedfortheabsenceofendo-,exodeoxyribonucleases,ribonucleasesandforsynthesisofstrand-specificRNA
产品描述:PurifiedfromE.colistrainscarryingtheplasmidsencodingtherespectiveRNApolymerases.AllthoseviralRNApolymeraseshaveastringentspecificityfortheirownpromotersandcatalyzethesynthesisofRNAfromribonucleosidetriphosphatesinthepresenceofaDNAtemplate
性状(以下信息仅供参考):液体
用途:用于RNA合成,合成的RNA可以用于或用作:杂交探针,基因组DNA序列分析,核糖核酸酶保护测定(RNaseprotectionassay),反义RNA合成,作为体外翻译的RNA模板,RNA剪接研究的底物,RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用,核酸扩增分析,siRNA、miRNA等小RNA。
来源:由大肠杆菌表达,表达基因为嗜菌体T3RNAPolymerase基因。
活性定义:37℃60分钟内,催化1nmolAMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件:40mMTris-HCl(pH8.0),6mMMgCl2,10mMDTT,2mMspermidine,0.5mMNTP,0.6MBq/ml[3H]-ATP,20µg/mlplasmidDNAcontainingthespecificT3RNAPolymerasepromotersequence。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
酶储存溶液:50mMTris-HCl(pH7.9,25℃),100mMNaCl,1mMDTT,1mMEDTA,50%(v/v)Glycerol,0.1%(w/v)TritonX-100.
TranscriptionBuffer(10X):400mMTris-HCl(pH7.9,25℃),20mMspermidine,60mMMgCl2,10mMDTT.失活或抑制:70℃加热10分钟可使T3RNAPolymerase失活。加入适量EDTA也可以使T3RNAPolymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制T3RNAPolymerase的活性。
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途
保存:-20℃
T3 RNA聚合酶