AH109 Chemically Competent Cell 产品说明书

产品规格
AH109:                      10×100μl            保存条件:-80℃

PGADT7(control vector):10ng/μl    10μl            保存条件:  4℃
Carrier DNA:             5ug/μl  100 μl            保存条件:  4℃
PEG/liAC:                        5 ml            保存条件:  4℃
 
 
基因型
 
MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ,LYS2 : : GAL1UAS-GAL1TATA-HIS3, MEL1 GAL2UAS-GAL2TATA-ADE2, URA3::MEL1UAS-MEL1TATA-lacZ

产品说明
 AH109感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,MATa型,可转化质粒或mating操作,Transformation  marker为: trp1, leu2,报告基因为:HIS3, ADE2, lacZ, MEL1,经PGADT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA 。

操作方法

1. 取100 μl冰上融化的AH109感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒1-5ug,Carrier DNA(95-100度5min,快速冰浴,重复一次)10 ul ,PEG/liAC  500ul并吸打几次混匀,30度水浴30 分钟(15 min时翻转6-8次混匀)。
2. 将管放42度水浴15min  (7.5 min时翻转6-8次混匀)。  
3. 5000 rpm 离心 40s 弃上清,ddH2O 400ul 重悬,离心 30s 弃上清。                      
4. ddH2O 50ul重悬,涂板。
5. 28-30度 ,培养48-96小时。
 

注意事项
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。